微球菌与葡萄球菌实验室区分方法

在临床微生物学实验室中，区分微球菌（Micrococcus）和葡萄球菌（Staphylococcus）是一项基础且重要的工作，因为它们在形态上相似（革兰氏阳性球菌），但临床意义、致病性和耐药性截然不同。

以下是系统性的实验室区分方法，从初步鉴定到确证试验：文章源自：微生物菌种网https://www.junzhucn.com微生物菌种网-https://www.junzhucn.com/weishengwu/jianding/729.html

一、初步观察与镜检

1. 革兰染色：两者均为革兰氏阳性球菌，无法区分。文章源自：微生物菌种网https://www.junzhucn.com微生物菌种网-https://www.junzhucn.com/weishengwu/jianding/729.html

2. 镜下排列：葡萄球菌：典型呈不规则的葡萄串状簇集，分裂面不规则。微球菌：通常呈四联状、成对或成簇，但排列可能更规整，有时也可呈不规则簇集。仅凭形态学不足以可靠区分。文章源自：微生物菌种网https://www.junzhucn.com微生物菌种网-https://www.junzhucn.com/weishengwu/jianding/729.html

二、关键生理生化试验（核心鉴别方法）

以下试验组合是区分的核心依据：文章源自：微生物菌种网https://www.junzhucn.com微生物菌种网-https://www.junzhucn.com/weishengwu/jianding/729.html

三、其他辅助鉴别特征

1. 菌落特征：文章源自：微生物菌种网https://www.junzhucn.com微生物菌种网-https://www.junzhucn.com/weishengwu/jianding/729.html

   微球菌：菌落常呈黄色、橙色或红色（色素产生更常见且鲜艳），质地较干燥、凸起。文章源自：微生物菌种网https://www.junzhucn.com微生物菌种网-https://www.junzhucn.com/weishengwu/jianding/729.html

          葡萄球菌：色素可变（金黄色、白色、柠檬色），金黄色葡萄球菌典型为金黄色，但很多凝固酶阴性葡萄球菌为白色。菌落通常较湿润、光滑。文章源自：微生物菌种网https://www.junzhucn.com微生物菌种网-https://www.junzhucn.com/weishengwu/jianding/729.html

2. 生长条件：文章源自：微生物菌种网https://www.junzhucn.com微生物菌种网-https://www.junzhucn.com/weishengwu/jianding/729.html

   耐盐试验：葡萄球菌能在6.5% NaCl肉汤中生长（特别是金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌），而微球菌一般不能生长。这是很好的鉴别点。厌氧生长：葡萄球菌能厌氧生长（发酵代谢），微球菌通常为专性需氧菌（氧化代谢）。

3. 生化反应：文章源自：微生物菌种网https://www.junzhucn.com微生物菌种网-https://www.junzhucn.com/weishengwu/jianding/729.html

   可用商品化的生化鉴定系统（如API Staph， VITEK GP卡等）。数据库会自动根据一系列生化反应结果进行区分。

四、临床意义的考量

葡萄球菌：是常见的致病菌。金黄色葡萄球菌（ coagulase阳性）是重要病原体。凝固酶阴性葡萄球菌（如表皮葡萄球菌）是常见的医院感染和植入物相关感染病原体。文章源自：微生物菌种网https://www.junzhucn.com微生物菌种网-https://www.junzhucn.com/weishengwu/jianding/729.html

微球菌：通常被认为是皮肤和环境中的污染菌或定植菌，致病性很弱，极少引起严重感染（多见于免疫功能严重低下者）。在血培养等无菌部位样本中分离到时常需谨慎评估其临床意义。

标准鉴别流程建议

对于临床分离的革兰氏阳性球菌，可遵循以下流程：

第一步：进行触酶试验。阳性则排除链球菌/肠球菌。

第二步：进行氧化酶试验和葡萄糖O/F试验。

氧化酶（+）且 O/F为氧化型（O） → 强烈提示为微球菌属。

氧化酶（-）且 O/F为发酵型（F） → 强烈提示为葡萄球菌属。

第三步：补充快速试验验证：

溶葡萄球菌素/呋喃唑酮敏感性试验。

6.5% NaCl生长试验。

第四步（必要时）：

对于葡萄球菌，进行凝固酶试验以区分金黄色葡萄球菌（阳性）与其他凝固酶阴性葡萄球菌。

使用自动化微生物鉴定系统或MALDI-TOF质谱进行最终鉴定。MALDI-TOF能快速、准确地鉴定到种水平，是目前最有效的方法。

总结：
最简单有效的初筛组合是：氧化酶试验（+） + 葡萄糖O/F试验（氧化型） → 微球菌。而氧化酶试验（-） + 葡萄糖O/F试验（发酵型） + 触酶（+） → 葡萄球菌。

在临床实验室中，一旦怀疑为微球菌（尤其来自非无菌部位样本），通常会直接注释为“皮肤定植菌”或“污染可能”，而不像对待葡萄球菌那样进行全套药敏试验。