最小抑菌浓度(Minimum Inhibitory Concentration,简称MIC)是指能够抑制微生物生长、繁殖的最低药物浓度。MIC的测定方法主要有以下几种: ### 一、稀释法 稀释法是最常用的MIC测定方法之一,包括微量稀释法和常量稀释法。 1. **微量稀释法** * **原理**:将抗菌药物以一系列倍比稀释的方式加入到含有培养基的小孔板(如96孔板)中,然后接种一定量的标准菌液,培养一段时间后观察细菌生长情况。 * **优点**:能够更准确地得到细菌对某种抗菌产品的MIC值。 * **缺点**:操作较为繁琐。 * **应用场景**:主要适用于需氧菌及局部兼性厌氧菌。 2. **常量稀释法** * **原理**:与微量稀释法类似,但通常在试管中进行。 * **优点**:通过观察培养基是否浑浊,可以较直观地判定测试样品对特定菌种的MIC值。 * **缺点**:只能测试水溶性好且清澈透明的样品,而且肉眼观察存在一定的误差。 ### 二、琼脂稀释法 * **原理**:将不同浓度的抗菌药物加入到融化并冷却至45℃左右的琼脂培养基中,混匀后倾注平板,待琼脂凝固后接种待测菌,培养后观察细菌生长情况。 * **优点**:可在一个平板上同时作多株菌的MIC测定,结果可靠,易发现污染菌。 * **缺点**:制备含抗菌药物的琼脂平板费时费力。 * **应用场景**:适用于不溶性抗菌产品。 ### 三、琼脂扩散法(如E-test法) * **原理**:在固体培养基表面均匀涂布待测细菌的菌悬液,然后贴上含有梯度浓度抗菌药物的试纸条(E-test条),培养后形成一个抑菌圈,通过测量抑菌圈的直径来间接判断MIC值。 * **优点**:操作简便,结果直观。 * **应用场景**:广泛应用于临床微生物实验室。 ### 四、操作步骤(以微量稀释法为例) 1. **准备培养基和药物**:选择适合微生物生长的培养基(如Mueller-Hinton Broth),配制并灭菌。将抗菌药物配制成贮存液备用。 2. **稀释药物**:在无菌条件下,使用培养基将药物贮存液稀释至一系列浓度梯度。 3. **接种细菌**:向每个含有不同药物浓度的孔中加入一定量的标准菌液。 4. **培养与观察**:将接种后的培养板置于适宜的温度下培养一段时间(通常为16~18小时),观察细菌生长情况。 5. **结果判定**:最低浓度下若无可见细菌生长,则此浓度即为该细菌对该药物的MIC。 ### 五、注意事项 1. **实验条件**:实验应在无菌环境下进行,遵循临床与实验室标准协会(CLSI)等相关标准。 2. **质控菌株**:每次实验时应使用标准质控菌株(如大肠埃希菌ATCC25922等)作为对照,以确保实验结果的准确性。 3. **培养基选择**:不同微生物对培养基的要求可能不同,应选择适合待测菌生长的培养基。 4. **药物稳定性**:某些抗生素的稳定性较差,应现配现用或低温保存,避免长时间放置导致药物活性降低。 通过以上方法,可以准确地测定不同微生物对不同抗菌药物的MIC值,为临床用药提供重要参考。您还有其他关于MIC测定的问题吗?
温馨提示:试剂为科研质控使用,不可用于临床及人体!非药用,非食用。
