微生物常用培养基大全：用途、配制、保存一次说透

培养基是人工配制的供微生物生长繁殖的营养基质，其组成、性质直接影响微生物的生长状态、代谢活动和培养效果。根据微生物种类和实验目的的不同，培养基可分为基础培养基、选择性培养基、鉴别培养基、增菌培养基等多种类型。以下按用途分类，逐一说明各类培养基的配方、配制方法和保存条件，最后附配制与保存的通用规范。

一、基础培养基（通用型）

基础培养基含有微生物生长所需的基本营养成分（碳源、氮源、无机盐、水），适用于大多数细菌的常规培养。文章源自：微生物菌种网https://www.junzhucn.com微生物菌种网-https://www.junzhucn.com/weishengwu/zhishi/809.html

1. 营养琼脂培养基（Nutrient Agar, NA）

用途：细菌总数测定、菌种纯培养和保藏、消毒效果测定。文章源自：微生物菌种网https://www.junzhucn.com微生物菌种网-https://www.junzhucn.com/weishengwu/zhishi/809.html

配方（每升） ：文章源自：微生物菌种网https://www.junzhucn.com微生物菌种网-https://www.junzhucn.com/weishengwu/zhishi/809.html

• 蛋白胨 10.0 g
• 牛肉膏粉 3.0 g
• 氯化钠 5.0 g
• 琼脂 15.0 g
• 最终pH 7.3±0.2

配制方法：称取本品33g，加入蒸馏水或去离子水1L，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装三角瓶，121℃高压灭菌15min，备用。文章源自：微生物菌种网https://www.junzhucn.com微生物菌种网-https://www.junzhucn.com/weishengwu/zhishi/809.html

保存：干粉培养基在5~30℃干燥避光保存，保质期三年；制备好的培养基须在2~8℃干燥避光保存。文章源自：微生物菌种网https://www.junzhucn.com微生物菌种网-https://www.junzhucn.com/weishengwu/zhishi/809.html

2. LB培养基（Luria-Bertani Medium）

用途：分子生物学中最常用的培养基，用于大肠杆菌等细菌的培养、质粒提取和蛋白表达。文章源自：微生物菌种网https://www.junzhucn.com微生物菌种网-https://www.junzhucn.com/weishengwu/zhishi/809.html

LB固体培养基配方（每升） ：文章源自：微生物菌种网https://www.junzhucn.com微生物菌种网-https://www.junzhucn.com/weishengwu/zhishi/809.html

• 胰蛋白胨 10.0 g
• 酵母提取物 5.0 g
• 氯化钠 10.0 g
• 琼脂粉 15.0 g

LB液体培养基配方（每升） ：文章源自：微生物菌种网https://www.junzhucn.com微生物菌种网-https://www.junzhucn.com/weishengwu/zhishi/809.html

• 胰蛋白胨 10.0 g
• 酵母提取物 5.0 g
• 氯化钠 10.0 g
• pH 7.2~7.4

配制方法：将各成分加入蒸馏水，定容至1L，搅拌至完全溶解，调节pH至7.2左右，121℃高压灭菌15min。如需含抗生素平板，灭菌后待培养基冷却至55℃（手可触摸）时再加入抗生素，摇匀倒板。文章源自：微生物菌种网https://www.junzhucn.com微生物菌种网-https://www.junzhucn.com/weishengwu/zhishi/809.html

保存：干粉阴凉处密封干燥保存，有效期2年；含抗生素平板4℃保存，2周内用完。文章源自：微生物菌种网https://www.junzhucn.com微生物菌种网-https://www.junzhucn.com/weishengwu/zhishi/809.html

二、选择性培养基（分离特定菌群）

选择性培养基通过添加抑制剂（胆盐、抗生素、高盐等）抑制非目标菌生长，促进目标菌增殖。

3. 麦康凯琼脂培养基（MacConkey Agar, MCA）

用途：志贺氏菌和致泻大肠埃希氏菌、产志贺毒素大肠埃希氏菌的选择性分离。

原理：牛肉蛋白胨提供碳氮源；乳糖为可发酵糖类；3号胆盐和结晶紫抑制革兰氏阳性菌；中性红为pH指示剂，细菌发酵乳糖产酸时菌落呈粉红色，周围出现胆盐沉淀的浑浊圈。

配方（每升） ：

• 牛肉蛋白胨 20.0 g
• 乳糖 10.0 g
• 3号胆盐 1.5 g
• 氯化钠 5.0 g
• 中性红 0.03 g
• 结晶紫 0.001 g
• 琼脂 15.0 g
• 最终pH 7.2±0.2

配制方法：称取本品51.5g，加入蒸馏水或去离子水1L，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装三角瓶，121℃高压灭菌15min，待冷至常温备用。

保存：干粉避光干燥处保存，用后立即旋紧瓶盖，有效期三年。

4. SS琼脂培养基（Salmonella-Shigella Agar）

用途：沙门氏菌属和志贺氏菌属的分离培养（强选择性培养基）。

原理：柠檬酸钠、胆盐、硫代硫酸钠和煌绿协同抑制肠道非病原菌及部分大肠杆菌的生长。

配方（每升） ：

• 示蛋白胨 10.0 g
• 牛肉膏 5.0 g
• 乳糖 10.0 g
• 琼脂 13.0 g
• 牛胆盐 8.5 g
• 枸橼酸钠 8.5 g
• 硫代硫酸钠 8.5 g
• 枸橼酸铁 1.0 g
• 中性红 0.025 g
• 煌绿 0.00033 g

保存：制好的培养基宜当日使用，或冰箱内48h内使用；煌绿溶液配好后10d内使用。

5. 伊红美蓝琼脂（EMB, Eosin Methylene Blue Agar）

用途：弱选择性培养基，用于分离肠道致病菌，特别是大肠菌群和粪大肠菌群。

原理：伊红和美蓝为抑菌剂和pH指示剂，可抑制革兰氏阳性菌。大肠杆菌发酵乳糖产酸，代谢产物与伊红、美蓝结合，使菌落呈深紫色并带有金属光泽。

配方（每升） ：

• 蛋白胨 10.0 g
• 乳糖 5.0 g
• 蔗糖 5.0 g
• 琼脂 13.5 g
• 磷酸氢二钾 2.0 g
• 伊红 0.4 g
• 美蓝 0.065 g
• 最终pH 7.2±0.2

配制方法：称取本品36g，加入蒸馏水或去离子水1L，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装三角瓶，121℃高压灭菌15min。

保存：4~8℃保存，切勿冻藏，有效期三个月。

6. 甘露醇高盐琼脂（Mannitol Salt Agar, MSA）

用途：金黄色葡萄球菌的选择性分离培养和计数。

原理：高浓度氯化钠抑制非葡萄球菌；D-甘露醇为可发酵糖类；酚红为pH指示剂——金黄色葡萄球菌发酵甘露醇产酸，使菌落周围培养基变黄。

配方（每升） ：

• 蛋白胨 10.1 g
• 肉浸粉 6.5 g
• 甘露醇 9.2 g
• 氯化钠 71.3 g
• 苯酚红 0.023 g
• 琼脂 13.8 g
• 最终pH 7.4±0.2

配制方法：称取本品111.0g于1L蒸馏水或去离子水中，煮沸溶解，分装，121℃灭菌15分钟。

三、真菌培养基

7. 沙氏葡萄糖琼脂（Sabouraud Dextrose Agar, SDA）/ 沙保氏培养基

用途：真菌的分离培养，真菌菌落总数检测。

原理：蛋白胨提供氮源，葡萄糖提供碳源，氯霉素抑制细菌生长。

配方（每升） ：

• 蛋白胨 10.0 g
• 葡萄糖 40.0 g
• 琼脂 15.0 g
• 氯霉素 0.1 g

配制方法：称取本品65.1g，加入蒸馏水或去离子水1L，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装三角瓶，115℃高压灭菌15min（注意：温度过高会破坏糖类）。

保存：干粉避光干燥处保存，用后立即旋紧瓶盖，有效期三年。

8. 马铃薯葡萄糖琼脂（Potato Dextrose Agar, PDA）

用途：霉菌和酵母菌计数及分离培养。

原理：马铃薯浸出粉提供氮源、碳源和维生素，有助于真菌生长；葡萄糖提供能源。

配方（每升） ：

• 马铃薯浸出粉 4.0 g
• 葡萄糖 20.0 g
• 琼脂 15.0~20.0 g

配制方法：称取本品46.0g，加入1000ml蒸馏水中，121℃高压灭菌15分钟。如需调pH至3.5±0.1，可在培养基冷至45℃时加入约14ml无菌10%酒石酸溶液。

四、特殊用途培养基

9. 高氏一号培养基（Gause‘s Medium No.1）

用途：放线菌的分离和培养。

原理：可溶性淀粉为碳源，KNO₃为氮源，多种无机盐提供微量元素。

配方（每升） ：

• 可溶性淀粉 20.0 g
• KNO₃ 1.0 g
• NaCl 0.5 g
• K₂HPO₄·3H₂O 0.5 g
• MgSO₄·7H₂O 0.5 g
• FeSO₄·7H₂O 0.01 g
• 琼脂 20.0 g
• 最终pH 7.2~7.4

配制方法：先将淀粉用少量冷水调成糊状，倒入沸水中，再依次加入其他成分（注意：磷酸盐与镁盐混合时易产生沉淀，需充分搅拌），分装后灭菌备用。

10. 液体硫乙醇酸盐培养基（Fluid Thioglycollate Medium, FTM）

用途：培养需氧菌、微需氧菌和厌氧菌；药品、生物制品无菌试验。

原理：硫乙醇酸钠和L-胱氨酸降低氧化还原电位，防止过氧化物积累；刃天青为氧化还原指示剂（粉红色表示氧化状态）；少量琼脂防止氧气扩散。

配方（每升） ：

• 酪胨（胰酶水解）15.0 g
• 酵母浸出粉 5.0 g
• 葡萄糖 5.0 g
• 硫乙醇酸钠 0.5 g
• L-胱氨酸 0.5 g
• 氯化钠 2.5 g
• 刃天青 0.001 g
• 琼脂 0.75 g

11. MRS培养基

用途：乳酸菌的分离、计数和培养。

配方（每升） ：

• 蛋白胨 10.0 g
• 牛肉浸粉 5.0 g
• 酵母浸粉 4.0 g
• 葡萄糖 20.0 g
• 吐温-80 1.0 ml
• 磷酸氢二钾 2.0 g
• 乙酸钠 5.0 g
• 柠檬酸三铵 2.0 g
• 硫酸镁 0.2 g
• 硫酸锰 0.05 g

配制方法：称取本品64.3g，加热溶解于1000ml蒸馏水中，121℃高压灭菌15分钟备用。

保存：室温干燥保存，有效期3年。

五、配制与保存通用规范

1. 配制前准备

• 用水：必须使用纯化水或蒸馏水，电导率≤1.0μS/cm（25℃），微生物污染≤100CFU/mL。
• 器具：烧杯、量筒、玻璃棒等经干热灭菌（160-180℃，23h）或高压蒸汽灭菌（121℃，15~30min）处理。
• 环境：在无菌室或超净工作台内进行，洁净度百级，操作前用75%乙醇擦拭台面。

2. 配制过程控制

• 称量：使用经校准的分析天平（精度≥0.01g），严格按照配方比例操作。
• 溶解：干粉先少量水混合防结块，边加边搅拌。含琼脂的培养基加热前应浸泡几分钟。
• pH调节：溶解后在室温下用pH计测量，用无菌1mol/L盐酸或氢氧化钠逐滴调节。除特殊说明外，灭菌后冷却至25℃时pH变化不超过0.2。
• 灭菌：不同培养基采用不同参数，严禁所有培养基统一用“121℃，30min”：
  • 营养琼脂、LB：121℃，15min
  • 含糖培养基（如SDA）：115℃，20min
  • 大容量（>1000mL）需调整灭菌条件
• 记录：记录培养基名称、批号、pH、配制日期、灭菌条件、配制人员等，便于追溯。

3. 保存规范

数据来源：

4. 质量控制要点

• 外观检查：观察培养基有无结块、分层、浑浊、变色、霉斑，固体培养基检查表面是否干燥开裂。
• pH复测：灭菌后冷却至室温测定pH，偏差需在标准规定的±0.2范围内。
• 生物功能性验证：用标准菌株（如大肠埃希氏菌ATCC25922、金黄色葡萄球菌ATCC25923）接种验证促生长能力和选择性。

注意：以上内容系根据公开网络资料整理汇总而成，仅供学习与参考，具体使用请以权威标准或最新版药典为准。