CFU测定基本步骤及注意事项详解

CFU（菌落形成单位）的测定是微生物学中常用的活菌计数方法。以下是CFU测定的基本步骤：

一、实验准备文章源自：微生物菌种网https://www.junzhucn.com微生物菌种网-https://www.junzhucn.com/weishengwu/zhishi/754.html

‌实验材料‌：无菌培养皿、无菌试管、无菌吸管、无菌接种环、酒精灯、适当的培养基（如牛肉膏蛋白胨固体培养基）、待测样品（如水样、食品样品等）、培养箱、显微镜、菌落计数器。文章源自：微生物菌种网https://www.junzhucn.com微生物菌种网-https://www.junzhucn.com/weishengwu/zhishi/754.html

‌样品准备‌：根据样品类型（固体或液体），进行适当处理。对于固体样品，进行均质化或研磨；对于液体样品，进行振摇以混匀。文章源自：微生物菌种网https://www.junzhucn.com微生物菌种网-https://www.junzhucn.com/weishengwu/zhishi/754.html

二、稀释与接种文章源自：微生物菌种网https://www.junzhucn.com微生物菌种网-https://www.junzhucn.com/weishengwu/zhishi/754.html

‌稀释‌：使用灭菌生理盐水作为稀释液，对样品进行连续稀释，通常选择10倍系列稀释。文章源自：微生物菌种网https://www.junzhucn.com微生物菌种网-https://www.junzhucn.com/weishengwu/zhishi/754.html

‌接种‌：使用无菌吸管吸取一定体积的稀释液，接种到含有适当培养基的无菌培养皿中。每个稀释度应接种多个培养皿以提高准确性。将培养皿内的培养基与稀释液充分混匀，可采用画圆或回转的方式，避免液体溅到培养皿边缘。文章源自：微生物菌种网https://www.junzhucn.com微生物菌种网-https://www.junzhucn.com/weishengwu/zhishi/754.html

三、培养文章源自：微生物菌种网https://www.junzhucn.com微生物菌种网-https://www.junzhucn.com/weishengwu/zhishi/754.html

‌培养条件‌：将接种后的培养皿倒置于培养箱中，设定适宜的温度和湿度条件进行培养。培养时间根据微生物种类和生长速度而定，通常为24~48小时。文章源自：微生物菌种网https://www.junzhucn.com微生物菌种网-https://www.junzhucn.com/weishengwu/zhishi/754.html

四、菌落计数文章源自：微生物菌种网https://www.junzhucn.com微生物菌种网-https://www.junzhucn.com/weishengwu/zhishi/754.html

‌观察与记录‌：培养结束后，使用放大镜或菌落计数器观察并记录每个培养皿上的菌落数量。文章源自：微生物菌种网https://www.junzhucn.com微生物菌种网-https://www.junzhucn.com/weishengwu/zhishi/754.html

‌选择计数范围‌：选择菌落数在30~300之间的培养皿进行计数，以保证计数的准确性和可靠性。如果菌落数过多或过少，可能需要调整稀释度或重新进行实验。

‌计算CFU数量‌：计算同一稀释度下多个培养皿的平均菌落数，然后乘以稀释倍数，得到每毫升（或每克）样品中的CFU数量。

五、数据处理与报告

‌数据处理‌：根据实验结果，计算CFU的数值，并进行适当的统计分析。

‌报告结果‌：报告结果时，应注明稀释倍数、培养条件以及菌落计数的具体方法。

注意事项

在整个实验过程中，必须严格遵守无菌操作规范，以防止污染。

培养基的种类和配方应根据待测微生物的种类和特性进行选择。

接种时应确保稀释液和培养基充分混匀，以避免菌落分布不均。

计数时应选择无蔓延菌落生长的培养皿进行计数，如果平板上有大片菌落生长，则不宜采用该平板的计数结果。