固体培养基接种细菌的步骤

细菌在固体培养基中的接种方式主要有以下几种： 1. **平板倾注法**： * **基本操作**：先往培养皿中倾注一定量的菌液（一般为1mL），然后再加入培养基，快速混匀，培养基凝固后，放入培养箱中培养。 * **基本用途**：用于细菌菌数总数计数。 * **方法特点**：对细菌菌落形态无要求，不要求分离菌株做纯培养，更利于厌氧菌或兼性厌氧菌的生长。 * **注意事项**：培养基倾注温度不可过高，温度过高会导致热敏感的菌株死亡，还可能造成平板凝固后表面有大量的冷凝水，导致平板表面的菌容易发生蔓延，建议将培养基冷却至45℃左右倾注平皿；倾注平皿不可过厚，否则可能会影响到菌落的生长。 2. **平板涂布法**： * **基本操作**：先倒好平板，每皿约倾倒20~25ml培养基，让其凝固，然后再将一定量的菌液（一般为0.1mL）加入平板上面，迅速用涂布棒在表面作来回左右的涂布，让菌液均匀分布，就可长出单个的微生物的菌落。 * **基本用途**：用于菌数总数计数，菌落形态观察。 * **方法特点**：更利于好氧菌的生长，可对菌落形态进行观察比较。 * **注意事项**：培养基倾注温度不可过高，温度过高会造成平板凝固后表面有大量的冷凝水，导致平板表面过湿，接种菌容易发生蔓延，建议将培养基冷却至46℃左右倾注平皿；加入菌液不宜超过0.2mL，否则不易将板子涂均匀，可能会影响到菌落的生长。 3. **平板划线法**： * **基本操作**：用接种环在平板培养基表面划线分离，主要有分区划线法和连续划线法两种。分区划线法是将平板分四区，故又称四区划线法。可将一个平板分成四个不同面积的小区进行划线，第一区（A区）面积最小，作为待分离菌的菌源区，第二和第三区（B、C区）是逐级稀释的过渡区，第四区（D区）则是关键区，使该区出现大量的单菌落以供挑选纯种用。为了得到较多的典型单菌落，平板上四区面积的分配应是D>C>B>A；另一种连续划线法是从平板边缘一点开始，连续作波浪式划线直到平板的另一端为止。 * **基本用途**：菌落分纯，菌落形态观察。 * **注意事项**：为方便划线，一般培养基不宜太薄，每皿约倾倒20~25ml培养基，培养基应厚薄均匀，平板表面光滑；有时单菌落并非都由单个细胞繁殖而来的，故必须反复分离多次才可得到纯种。 4. **三点接种法**： * **基本操作**：把少量的微生物接种在平板表面上，成等边三角形的三点，让它各自独立形成菌落后，来观察、研究它们的形态。除三点外，也有一点或多点进行接种的。 * **基本用途**：研究霉菌形态。 5. **斜面接种法**： * **基本操作**：用接种环取单个菌落或少许细菌，伸入斜面试管的底部，轻轻向上划线（直线或曲线，根据需要确定），一直划到斜面顶端。 * **基本用途**：主要用于单个菌落的纯培养、保存菌种或观察细菌的某些特性。 * **注意事项**：划线时注意勿刮破培养基；将沾有菌苔的接种环迅速抽出试管时，注意勿使接种环碰到管壁或管口上。 6. **穿刺接种法**： * **基本操作**：用接种针蘸取少量的菌种，沿固体或半固体培养基中心向管底作直线穿刺，然后按原来的穿刺线将接种针拔出。 * **基本用途**：保藏厌氧菌种或研究微生物的动力。 这些接种方式各有特点，适用于不同的研究目的和实验条件。在实际操作中，应根据具体需求选择合适的接种方式。 文章源自：微生物菌种网https://www.junzhucn.com微生物菌种网-https://www.junzhucn.com/weishengwu/zhishi/656.html